近年來(lái)，隨著生物醫(yī)藥領(lǐng)域的迅猛發(fā)展，細(xì)胞治療等項(xiàng)目成為了生物醫(yī)藥領(lǐng)域的熱點(diǎn)。與此同時(shí)，各國(guó)法規(guī)和相關(guān)機(jī)構(gòu)也在逐步加強(qiáng)對(duì)生物制品安全性和可靠性的監(jiān)管。其中一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題是“如何確保生物制品在生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有支原體污染"。針對(duì)涉及細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品工藝過(guò)程，各國(guó)法規(guī)均相關(guān)的檢測(cè)要求。

傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法是各國(guó)《藥典》中都認(rèn)可的支原體檢測(cè)方法。但是這兩種相對(duì)“古早"的檢測(cè)手段，有難以避免的缺點(diǎn)：培養(yǎng)法檢測(cè)周期長(zhǎng)、指示細(xì)胞法靈敏度低。導(dǎo)致生物醫(yī)藥相關(guān)企業(yè)，在生產(chǎn)或產(chǎn)品放行過(guò)程中，出現(xiàn)周期拉長(zhǎng)的情況。行業(yè)內(nèi)部對(duì)支原體檢測(cè)時(shí)效性和靈敏度要求越來(lái)越高，因此NAT方法從眾多支原體檢測(cè)方法中脫穎而出。

目前《歐洲藥典》（EP）<2.6.7>，《日本藥典》（JP）以及《美國(guó)藥典》（USP）<63>都已收錄NAT方法作為支原體檢測(cè)方法，但需要對(duì)該方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，與傳統(tǒng)方法進(jìn)行對(duì)比，對(duì)比項(xiàng)目包括特異性、檢測(cè)靈敏度等指標(biāo)，要求NAT法結(jié)果不低于傳統(tǒng)方法，才可以使用。2020版《中國(guó)藥》典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測(cè)方法，但其中也提到了“也可采用經(jīng)國(guó)家藥品檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可的其他方法"。

不同藥典在特異性（Specificity）、檢測(cè)限（Detection Limit）和耐用性（Robustness）三方面進(jìn)行了要求。

特異性

特異性指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的檢測(cè)和分析方法能正確測(cè)定出待檢物種的能力。《歐洲藥典》中提到，“需要在驗(yàn)證中關(guān)注與系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系比較近的其他細(xì)菌種屬之間的交叉反應(yīng)，如革蘭氏陽(yáng)性菌包括梭菌屬Clostridium、乳桿菌屬Lactobacillus和鏈球菌屬Streptococcus。"

檢測(cè)限

檢測(cè)限是指樣品中被測(cè)物能被檢測(cè)出的限度。

對(duì)需要進(jìn)行檢測(cè)限確認(rèn)的支原體類(lèi)型，試劑盒廠家需盡可能多的覆蓋法規(guī)藥典中要求的支原體類(lèi)型。

耐用性

耐用性系是指，檢測(cè)條件有小的變動(dòng)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不受影響的承受程度。比如，抑制物質(zhì)實(shí)驗(yàn)可檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的耐用性。

好物推薦

德國(guó)Minerva Biolabs支原體檢測(cè)系列，通過(guò)《歐洲藥典》和《日本藥典》方法學(xué)驗(yàn)證，支原體DNA提取試劑盒、支原體qPCR檢測(cè)試劑盒、支原體標(biāo)準(zhǔn)品都具備。

Venor®GeM Sample 

preparation Kit

支原體DNA提取試劑盒，符合歐洲藥典的要求，從細(xì)胞上清和生物制品中，均可分離支原體DNA，全程只需30分鐘。洗脫DNA純度高，體積50μl，保證PCR的靈敏。

Venor®Gem qEP

經(jīng)典法支原體qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求；高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到10^7種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察。

支原體標(biāo)準(zhǔn)品

涵蓋支原體靈敏度保準(zhǔn)品（檢測(cè)限和耐用性驗(yàn)證）、支原體特異性標(biāo)準(zhǔn)品（特異性）和支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品（定量檢測(cè)）三大類(lèi)。