芽孢桿菌鑒定試劑盒

HiBacillus™ Identification Kit

概況

該試劑盒包含7種傳統(tǒng)生化檢查和5種糖發(fā)酵檢查。微生物的發(fā)酵反應(yīng)，引起培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。

使用說(shuō)明

待鑒定菌種應(yīng)先進(jìn)行分離和純化。可挑取一個(gè)菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯（M210）中，在35-37℃培養(yǎng)4-6小時(shí)，直到在620nm處，接種液濁度≥1.0OD。

無(wú)菌打開(kāi)試劑盒，撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線(xiàn)。在35℃-37℃孵育24-48小時(shí)。

結(jié)果判定

依據(jù)結(jié)果詮釋表。在第2孔和第5孔，在24-48小時(shí)孵育期結(jié)束后，分別添加如下試劑：

1.觸酶試驗(yàn)：第6孔

用接種環(huán)刮取第1孔內(nèi)表面，將接種環(huán)蘸到含3%H2O2的干凈小試管中。

接種環(huán)表面冒泡為陽(yáng)性。接種環(huán)表面沒(méi)有冒泡為陰性。

注意：3%的H2O2需新鮮配置。

2.硝酸鹽還原試驗(yàn)：第5孔

加1-2滴對(duì)氨基苯磺酸（R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（R009）

立即出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性

顏色無(wú)變化為陰性

3.伏-普試驗(yàn)：第2孔

加1-2滴Barritt試劑A(R029)和1-2滴Barritt試劑B（R030）

10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽(yáng)性

無(wú)顏色變化或有輕微變化為陰性。

4.糖發(fā)酵試驗(yàn)：第8孔-第12孔

酸產(chǎn)生導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色由紅變黃，為陽(yáng)性反應(yīng)。

如果仍保持紅色，則為陰性。

12種生化反應(yīng)

鑒定的芽孢桿菌物種

蠟樣芽孢桿菌（B.cereus）

短小芽胞桿菌（B.pumilis）

枯草芽孢桿菌（B.subtilis）

凝結(jié)芽孢桿菌（B. coagulans）

萎縮芽孢桿菌（B. atrophaeus）

巨大芽孢桿菌（B. megaterium）

蘇云金芽孢桿菌（B. thuringensis）

儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期

2℃-8℃；12個(gè)月

引用文獻(xiàn)

DebajitBorah, R.N.S. Yadav. UV Treatment Increases Hydrocarbon DegradingPotential of Bacillus spp. Isolated from AutomobileEngines. American-Eurasian J. Agric. & Environ. Sci., 12 (6): 760-763,2012